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第203章 孙教授:打不过能加入吗?

    手术顺利结束。

    真是千篇一律的结局。

    真是,最好的结局。

    江河洗手,回到更衣间。

    从柜子里拿出沙糖橘,剥开。

    再尝一口,还是好吃的。

    一点都不涩,但他不由得想起当年,好涩的当年。

    小江同志在京交换学习的时候,在医院里被前辈们天天指着鼻子臭骂。

    好在无论多晚回到家,家中总有沈老师在等他。

    好温柔的沈老师呀。

    会放好热水,加入一些艾草,说是自学的中医料包,为了给小家省钱。

    然後她会半蹲在地上,替江河脱去袜子,再把他的脚浸入热水中。

    ——

    假装嫌弃的去洗洗手,再绕到床上,给江河按摩。

    软软的声音在耳边响起:「江医生,今天辛苦啦。」

    江河一直觉得媳妇在这一块就是纯魅魔。

    明明她没有勾引的想法,只是单纯的想对自己好,但却风情万种。

    沈老师的按摩手法也很专业。

    问她跟谁学的,她说常常给奶奶按,练出来的。

    江河:赞美奶奶。

    按了一会儿之後。

    江河便仰起头,看向沈钰的脸,忍不住捉住她的手腕,轻声问:「媳妇,你怎麽对我这麽好呀?」

    沈钰会笑盈盈地说:「因为我锺意你呀。」

    他笑着捏捏她的脸颊:「又学粤语啦?」

    沈钰嘿嘿一下,下巴抵着他的额头,说道:「系呀,我怕我不会说粤语,咱爸咱妈到时候不喜欢我————」

    江河忍不了了,猛地转过身就要去吻她。

    「哎呀别闹,泡脚呢————」

    沈钰笑着躲闪,就是不给亲。

    江河啧一声,直接将她扑倒在床上。

    被按在床上,沈钰不再躲了,无处可躲。

    江河双臂撑在她耳畔。

    沈钰也静静地回望。

    两人的眼睛里,是满满当当、快要溢出来的爱意。

    对视了片刻,沈钰勾住江河的脖颈,吻了上来。

    江河也熟练地把手抚上。

    吻了好一会儿之後,沈钰微微喘着气退开半寸,点了点江河的嘴唇,心疼道:「你的嘴巴好干啊,起皮了都。」

    说着,她侧过身,从床头柜上拿过一瓣沙糖橘。

    将橘肉含进嘴里,咬破果肉,重新凑上前,将鲜甜的橘子汁水,嘴对嘴喂给他。

    太涩了。

    江河这还能忍得住?

    立刻将沈老师的睡裙掀到了腰际咚咚。

    有人敲门。

    江河回过神来,见杨煦在外面,手里也拿着个橘子在剥。

    老师看见江河盯着橘子不语。

    便把手里剩下的半个递给江河:「吃不?」

    江河叹了口气:「行。」

    「我跟阿婆说了,手术很成功,肿瘤切得很乾净,胆肠吻合也很顺利,人已经平安送去ICU观察了,老太太一听,差点要跪下,被护士长拉住了,这老赵一家,不容易啊。」

    江河不语,一味吃橘。

    杨煦想了想,道:「江河,你在此地不要走动,我想去买点橘子。」

    江河:「?」

    一时间摸不清楚老师是在占便宜还是讲真的。

    杨煦继续说:「咱们科室最近大家都挺辛苦的,连轴转,我想着,乾脆直接找老太太买个几百斤橘子,给科室里的医生护士都分分,权当是发点福利。」

    江河听懂了,温和道:「行,老师,顺便帮我也买些吧,我带回学校去,给班上的同学分点,项目组那边最近熬夜多,正好也给大家尝尝。」

    杨煦笑了:「你小子,现在是独立医疗组长,拿副高待遇了,起码买两百斤。」

    「好,没问题,学校人多,总分的完。」

    医院冷冷的灯光下。

    两人是满满的善意。

    「说起项目组————」杨煦咳嗽一声,「咱们今天也没别的手术安排了,正好,去一趟学校?」

    江河歪头:「去学校干嘛?」

    「去看看你们那个miRNA早筛项目做得怎麽样了啊,作为你的导师,我得时刻关注你的科研进度,再说了,买橘子的事也得跟他们说一声,顺便————带几个现成的橘子给他们尝尝。」

    江河心中一乐。

    看项目是假,送橘子是假。

    想去见王晓晴教授才是真!

    「好的老师,走吧。」

    去南医大的路上,杨煦亲自开车。

    「江河啊,王教授他们在实验室,有没有什麽难点?」

    江河随口答道:「刚卡在RNA提取这一步,血清里的游离核酸含量太低,蛋白又多,TrizoI法很容易带入杂质,A260/280的比值一直上不去。」

    「那你们现在是怎麽解决的?」杨煦开始套话。

    ——

    江河笑了笑,心中了然,便详细地讲解了一下:「双重氯仿抽提,加糖原共沉淀,第一次加氯仿离心後,吸取上清液,移入新的离心管,再加一次等体积的氯仿进行第二次离心,这样可以最大限度去除蛋白污染,浓度不够的问题,就在加异丙醇沉淀前,补5微升5mg/ml的糖原作为共沉淀剂。」

    杨煦连连点头。

    半小时後,两人提着一袋橘子,来到学校实验室。

    听到推门声,众人擡起头。

    「杨主任?」

    「老大?」

    「来来来,大家先停一下手里的活,休息十分钟。」杨煦热情地招呼着,「这是我跟江河特意给你们带的沙糖橘,尝尝,甜得很。」

    众人闻言,纷纷围了过来。

    王晓晴也拿起一个橘子剥开。

    杨煦状似自然的站到王晓晴旁边。

    随口说道:「我看你们这进度,是在做RNA提取的最终洗涤吧?」

    王晓晴点头:「嗯,江河刚定下的方案,这批是用双重氯仿法跑的,还在等离心结果。」

    「双重氯仿法,是个好思路。」

    杨煦道:「血清样本和组织样本不一样,Trizol试剂用在血清上,最大的痛点就是蛋白含量超标,你们在吸取水相上清液的时候,稍有不慎就会把中间的蛋白层带出来,这会导致下游逆转录直接失败。」

    「所以,牺牲第一次的取液量来换取纯度是极其必要的,把第一次吸出的上清液,再加一次等体积的氯仿,剧烈震荡後进行二次离心,这样一来,蛋白杂质基本就被洗乾净了。」

    几个学生都纷纷点头。

    杨教授不愧厉害。

    说的跟江河说的一模一样。

    王晓晴也有些意外地看向杨煦:「杨主任,你对基础分子实验也这麽有研究?」

    杨煦故作谦虚:「医学是不分家的嘛,临床和基础本来就是相辅相成的,再说了,你们这套方案,为了补足二次抽提带来的浓度流失,肯定在沉淀前加了东西吧?」

    王晓晴再度惊讶,乖巧点头:「确实。」

    「5微升,5mg/mI的糖原,糖原作为共沉淀剂,不影响下游的PCR扩增,还能让微量的RNA在管底形成肉眼可见的沉淀团块,我说的对吧?」

    「对的对的。」

    王晓晴觉得杨煦有点厉害了,稍有些崇拜。

    杨煦心里乐开了花,脸上云淡风轻。

    他转过头,看了江河一眼,挑了挑眉毛。

    江河默默地剥开一个橘子,把目光偏向窗外,看天。

    想装就装吧,谁让你是我老师呢。

    休息时间结束。

    实验重新运转。

    接下来的环节是沉淀後的无水乙醇洗涤。

    王晓晴准备亲自操作移液枪。

    杨煦在她旁边轻声提醒,美其名曰指导:「王教授,样本沉淀物很小,洗涤的时候,枪头最好贴着管壁对侧下去。」

    「我知道。」

    「吸的时候慢一点,拇指控制好二挡的回弹力度。」

    「杨主任,你挡着我光了。」

    「哦哦,抱歉,习惯性盯紧细节。」

    就在这时,许久未见的孙长明教授来串门了。

    「哎哟,都在忙呢?」

    他今日看着心情不错,背着手,春风得意的。

    目光扫过全场,看见杨煦也在,笑意更深:「老杨也在啊?怎麽,今天医院不忙啊?」

    杨煦脸上的笑容一下就消失了,道:「来看看项目进度,你来干什麽?」

    「我?我是来分享学术经验的。」

    孙长明悠然道:「你们还在搞RNA提取?设备用得还习惯不?」

    杨煦冷漠:「挺好的,不劳孙教授费心。」

    孙长明嘿嘿一笑:「老杨啊,其实我今天过来是想说,我们研究所那边,消化道肿瘤的RNA提取纯化,刚刚取得了重大突破。」

    此话一出,实验室里的众人都擡起了头。

    孙长明:「大家都知道,消化液和血清里的RNA极其容易降解,我们团队花了一个月的时间,反覆调整试剂配比,终於摸索出了一套极限纯化的办法。」

    王晓晴好奇道:「噢?说来听听。

    孙长明坐直了身体,开始长篇大论:「最重要的就是放弃传统的Trizol,我们采用了矽胶膜离心柱法结合多重酶解,首先,在裂解阶段加入高浓度的蛋白酶K,56度水浴消化一个小时,然後,利用离心柱进行过柱,为了洗掉多糖杂质,我们专门配制了一种含高浓度盐酸胍和异丙醇的洗脱液,反覆洗脱三次。」

    「虽然这个流程耗时要四个多小时,成本也高,但纯度那是没得说,A260/280的比值,我们稳定做到了1.75以上!这在当前的液体活检领域,绝对是领先水平!」

    说完,孙长明往椅背上一靠,端起桌上的水杯喝了一口,等待着惊叹声。

    1.75的纯度,在08年,确实值得骄傲。

    然而,实验室里众人的表情都怪怪的。

    大家面面相觑,好像不知道该说什麽好。

    孙长明皱了皱眉:「怎麽?没听懂?也是,这套酶解过柱的体系确实复杂了点,你们刚接触湿实验,慢慢来————」

    「不是,孙教授。」陈浩默默地举起了手,「我有个问题。」

    「你说。」孙长明点点头。

    陈浩语气真诚地发问:「既然是要解决蛋白污染和降解的问题,为什麽一定要用蛋白酶K去水浴消化一个小时,还要花那麽高成本去买离心柱反覆洗脱呢?」

    孙长明愣了一下:「不用这些,你怎麽去蛋白?怎麽提纯?」

    陈浩理所当然地回答:「双重氯仿抽提,加糖原共沉淀啊,我们老大提出来的这个方法,牺牲点第一次的上清液体积,再加一次氯仿离心,蛋白就全沉下去了,然後补5微升糖原把RNA析出来,整个流程下来四十分钟就搞定了,效果很好呀,为什麽要搞得像你那麽复杂?」

    孙长明:「?」

    反应了半天後,孙长明抗拒道:「不对,氯仿确实能去蛋白,但你抽提两次,水相里的RNA早就流失得七七八八了,就算加了糖原,浓度也绝对达不到下游要求,纯度就更别提了,能过1.5都算你们运气好。」

    「可是————」蔡卓群在旁边忍不住插嘴。

    「没什麽可是的,科研需要的是严谨,你们用这种糙办法,跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。」

    就在这时,很巧嗷。

    离心机跑的新一批内容出来了。

    陈浩道:「孙教授,数据是不是真的,测一下就知道了。」

    蔡卓群立刻上前,打开离心机盖,加入无酶水,溶解。

    NanoDrop分光光度计前。

    1微升的样本滴入基座。

    测量!

    屏幕刷新,一排数据跳了出来。

    浓度:14.5ng/ul。

    A260/280:1.95。

    A260/230:2.03。

    孙长明:「啊?」

    1.8到2.0是RNA纯度的完美区间。

    他引以为傲、耗时四小时、加了各种昂贵试剂才跑出的1.75。

    可这个呢?

    1.95是什麽鬼啊!

    「换一管,再测。」孙长明不信邪。

    蔡卓群依言换了第二个样本。

    浓度:13.8ng/260/280:1.92。

    第三管。

    浓度:15.1ng/260/280:1.96。

    极其稳定的高纯度,完美的数据重现性,没有任何悬念的绝对碾压。

    孙长明,不嘻嘻。

    陈浩在旁边补了一刀:「孙教授,你看,四十分钟提出来的,效果是不是比你那个好多了?」

    杨煦绷不住了,哈哈大笑:「老孙啊,你那个蛋白酶K水浴一小时的方法,确实挺有创意的,就是费时费力还费钱,没关系,坚持你的想法,相信你一定行!」

    孙长明沉默半天,最後也客气的笑道:「嗯————数据还算凑合吧,不过,不同组织的样本特性不一样,你们这套方法在血清上管用,在我们消化道黏液样本上,未必适用,科研嘛,就是要在不同的方向上多做尝试,加油吧。」

    「哎呀,想起来了,我培养箱里的那些细胞还没换液呢,今天就不跟你们多聊了,走了啊。」

    他说完,便朝门口走去。

    轻轻的他走了,正如他轻轻的来,挥一挥衣袖,不带走一丝云彩~

    出门。

    孙长明伸手捂住胸口,喘不上气。

    呃啊,难受啊!

    「双重氯仿————糖原————」

    孙长明一边扶着墙往研究所走,一边在嘴里反覆念叨着这几个词。

    「妈的,这小子到底怎麽想出来的?这哪来的方法?我什麽时候能跟他一起做实验?」

    孙教授试图依赖江河。

    要不把项目组解散算了,打不过就加入吧?

    王教授不都加入学生团队了吗,我就不行?

    嗯————现在还来得及吗?

    有没有什麽优雅的投靠姿势?在线等,挺急的。

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